藥物(wù)研發中穩定性研究是一項重要的研究内容。其中使用(yòng)期間穩定性試驗是考察包裝(zhuāng)制劑對臨床和患者安(ān)全使用(yòng)不可(kě)或缺的内容，其主要針對兩部分(fēn)制劑：

1、使用(yòng)前需要重新(xīn)配制的制劑，主要考察藥物(wù)在配制或稀釋過程中不同種類、不同形态、不同體(tǐ)積的組分(fēn)在混合過程中可(kě)能(néng)會發生各種化學(xué)物(wù)理(lǐ)變化，從而産生新(xīn)的降解産物(wù)導緻雜質(zhì)譜的改變，以及在配制過程中可(kě)能(néng)引入的細菌、微生物(wù)等新(xīn)的污染；

2、多(duō)劑量包裝(zhuāng)制劑，主要是初次使用(yòng)後會不可(kě)避免地接觸到空氣、水分(fēn)、光等外界因素從而可(kě)能(néng)影響含量、外觀、産生新(xīn)的降解産物(wù)，重複打開使用(yòng)和關閉操作(zuò)也可(kě)能(néng)導緻微生物(wù)的污染，細菌繁殖等。對于注射給藥制劑、眼用(yòng)制劑以及吸入制劑，由于此類制劑對于微生物(wù)限度要求較高，如果藥物(wù)在使用(yòng)期間質(zhì)量不符合要求會造成潛在的安(ān)全隐患，因此使用(yòng)期間穩定性試驗顯得尤為(wèi)重要。

針對此，EMA、ICH和WHO等均發布了相關指導原則從而有效指導了使用(yòng)期間穩定性試驗的開展。筆(bǐ)者将從1、批次的選擇及考察時期，2、試驗期間樣品放置條件，3、考察指标，三個方面對各指導原則中穩定性研究的技(jì )術要求進行探讨并對比，幫助申請人更好的辨别不同申報方向的上市申報的具體(tǐ)要求，更有利于産品的上市注冊申報。

01

批次的選擇及考察時期

EMA和WHO均要求至少考察兩批，其中一批至少為(wèi)中試規模，至少一批為(wèi)近效期樣品，若遞交時不能(néng)獲得近效期樣品，如果申報時不能(néng)獲得近效期樣品，則在申報時可(kě)獲得的最後一個時間點取樣考察。EMA同時要求使用(yòng)的包裝(zhuāng)系統應等同于上市包裝(zhuāng)系統，針對樣品為(wèi)多(duō)個規格或采用(yòng)多(duō)種包裝(zhuāng)材料，可(kě)以采用(yòng)最容易引起變化的規格或包裝(zhuāng)，同時給出選擇理(lǐ)由。

ICH要求采用(yòng)與穩定性試驗相同的主批次，但未明确采用(yòng)的批次數目。應在長(cháng)期穩定性開始及試驗結束時取樣考察。如果申報時不能(néng)獲得近效期樣品，則在第12個月或申報時可(kě)獲得的最後一個時間點取樣考察。

FDA未明确采用(yòng)的批次數目以及考察時期。

CDE在化學(xué)藥品注射劑仿制藥質(zhì)量和療效一緻性評價技(jì )術要求裏指出，對于穩定性差的産品，臨床配伍穩定性研究應至少包括兩批自制樣品（建議其中一批未近效期樣品），其他(tā)産品可(kě)采用(yòng)一批自制樣品。對于生物(wù)制品國(guó)内尚無明确的法規要求，大多(duō)數的生物(wù)制品穩定性較差，若按照以上化藥的批次選擇的原則，生物(wù)制品上市申報時，是不是也得考察至少兩批自制樣品呢(ne)？讓我們拭目以待CDE後續的針對生物(wù)制品的法規要求。

02

試驗期間樣品放置條件

EMA和WHO規定應盡可(kě)能(néng)模拟藥物(wù)使用(yòng)的實際過程，考慮容器的填充體(tǐ)積以及使用(yòng)前的配制和稀釋過程。如果在實際中需要抽取一定量的藥物(wù)或藥液，則試驗時應模拟同樣的情形。取樣測定時應置于實際的使用(yòng)環境下進行。

ICH和FDA指出，産品複溶或稀釋後的穩定性考察，為(wèi)說明書中的産品複溶或稀釋配制、存儲條件和使用(yòng)期限提供依據。

CDE在生物(wù)制品穩定性研究技(jì )術指導原則以及創新(xīn)藥（化學(xué)藥）III期臨床試驗藥學(xué)研究信息指南中均指明，此部分(fēn)信息應能(néng)支持臨床方案中的用(yòng)法，以評估實際使用(yòng)情況下産品的穩定性。

綜上，使用(yòng)期間穩定性樣品的放置條件應盡可(kě)能(néng)模拟實際的使用(yòng)過程，包括用(yòng)法、用(yòng)量以及待測樣品的放置條件。

03

考察指标

EMA和WHO指出，能(néng)反應使用(yòng)過程中穩定性變化的物(wù)理(lǐ)、化學(xué)、生物(wù)及微生物(wù)指标需要被監測，EMA提供示例如下：

物(wù)理(lǐ)：顔色、澄清度、包裝(zhuāng)完整性、不溶性微粒、粒徑

化學(xué)：API含量、防腐劑含量、抗氧劑含量、pH

微生物(wù)：總菌落數、無菌

FDA還指出，針對無菌且使用(yòng)前需要複溶（或進一步稀釋）的産品，申請人需要進行微生物(wù)試驗以支持說明書中産品複溶後或稀釋後的最差儲存條件，該試驗作(zuò)為(wèi)一項風險評估應能(néng)證明複溶後或稀釋後的産品在拟定的儲存條件下，污染的外來微生物(wù)不會增長(cháng)（即增長(cháng)量不超過0.5log10）。

CDE在多(duō)篇已發表的公開文(wén)獻中指出，制劑與葡萄糖注射液進行配伍試驗時，需要考察5-羟甲基糠醛的變化情況。從近兩年CDE針對上市申請項目的補充資料通知中也可(kě)以看出，凡是與葡萄糖注射液配伍均被要求監測5-羟甲基糠醛的變化情況。

此外，各指導原則均要求，使用(yòng)期間的穩定性測試所采用(yòng)的分(fēn)析方法必須經過驗證（包括國(guó)内要求的5-羟甲基糠醛的檢測方法），證明其精(jīng)密度、靈敏度、準确度和重現性等符合相應的要求。

從以上總結可(kě)以看出，不同方向對于使用(yòng)期間的穩定性具體(tǐ)的要求也不同。在設計使用(yòng)期間穩定性試驗時，建議按照申報方向的具體(tǐ)要求，同時結合其他(tā)方向的要求，模拟真實使用(yòng)情況，設計合理(lǐ)的試驗策略，全面考察臨床使用(yòng)期間穩定性。目前國(guó)内對使用(yòng)期間穩定性試驗的具體(tǐ)要求還不是特别明确，尤其是針對生物(wù)制品使用(yòng)期間穩定性試驗的相關要求還有待完善。

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杭州皓陽生物(wù)技(jì )術有限公司成立于2015年，專注于為(wèi)抗體(tǐ)/重組蛋白客戶提供早期成藥性評估、抗體(tǐ)藥物(wù)偶聯開發、穩定細胞株構建、工藝開發、中試生産、IND申報和臨床樣品生産，培養基開發定制等多(duō)平台一站式研發服務(wù)。在上海杭州兩地設有研發中心和生産基地，目前擁有員工180餘人。上海研發中心依托多(duō)種分(fēn)析手段和瞬時表達平台為(wèi)客戶提供從人源化設計，活性分(fēn)析到成藥性分(fēn)析多(duō)維度的分(fēn)子設計和評估。杭州中心擁有自主開發可(kě)授權的高表達穩定細胞株平台（皓越）和工藝開發平台，建有完善的250L和500L規模原液和成品GMP生産線(xiàn)，能(néng)夠在8個月左右提供從DNA到毒理(lǐ)批樣品交付，12-15個月内完成IND申報準備工作(zuò)。同時公司還在建6*2000L商業化生産線(xiàn)，預計于2024年底陸續投入使用(yòng)。皓陽生物(wù)緻力于通過幫助新(xīn)藥研發，推動生物(wù)醫(yī)藥領域的進步，實現創新(xīn)為(wèi)民(mín)、科(kē)技(jì )惠民(mín)的目标。

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