過去三十年間，随着抗體(tǐ)及其他(tā)生物(wù)大分(fēn)子藥的成功上市，生物(wù)制藥行業迎來了前所未有的蓬勃發展。時至今日，抗體(tǐ)發現平台技(jì )術日臻成熟，無論是通過免疫動物(wù)抑或噬菌體(tǐ)展示平台，對于大多(duō)數靶點均能(néng)得到多(duō)個功能(néng)符合要求的候選分(fēn)子。然而，受資源和成本所限，通常隻有一兩個最終分(fēn)子可(kě)以推進到生物(wù)制藥下遊環節。那麽選誰，如何選，是制藥人一直在探索的問題。最初的評價機制是完全建立在功能(néng)活性的排序上，但很(hěn)快人們就發現這種選擇機制導緻不少新(xīn)藥分(fēn)子在生産，儲運，甚至安(ān)全性上遇到挑戰。有些問題，通過制劑的不斷努力，如凍幹工藝的開發，得以“退讓”解決，而另一些分(fēn)子則隻能(néng)遺憾退場。這些慘痛的經曆告訴我們，想要降低後期工藝開發的成本和臨床階段的風險，那麽除了活性，候選分(fēn)子還要具備最起碼的可(kě)開發性，穩定性以及安(ān)全性，也就是我們現在講的“成藥性”。

成藥性評價究竟應該包含哪些檢測項目

不同技(jì )術背景的公司給出的具體(tǐ)答(dá)案不盡相同，但大方向上集中于分(fēn)子的可(kě)生産性，後修飾穩定性，自身相互作(zuò)用(yòng)，免疫原性以及藥代動力學(xué)性質(zhì)上。目前業界基本有兩種體(tǐ)系，一種從原理(lǐ)出發，将分(fēn)子所有特性歸納為(wèi)分(fēn)子自身相互作(zuò)用(yòng)和分(fēn)子與其他(tā)分(fēn)子的相互作(zuò)用(yòng)；另一種體(tǐ)系則多(duō)是制藥企業遵循新(xīn)藥研發流程，将一些重要且對後續産品開發有指導意義的檢測提前進行，組成“成藥性評價”。無論哪種體(tǐ)系，考慮到抗體(tǐ)開發階段，候選分(fēn)子數目多(duō)，樣品量少的特點，基于序列的分(fēn)析預測和高通量的體(tǐ)外檢測方法成為(wèi)了成藥性分(fēn)析的首選。

基于序列的分(fēn)析預測

基于序列的分(fēn)析預測，各家内容較為(wèi)一緻，無外乎是Fv區(qū)域内非配對的Free-cys ，Deamidation site ， Isomerization site ，N-glycosylation site 等 PTM 的排查以及理(lǐ)論pI和電(diàn)荷分(fēn)布的預測。在這些分(fēn)析項中，除Free-cys， N-glycosylation site 和 pI 的預測和實驗結果關聯度較高以外，Deamidation / Isomerization / Oxidation / O-glycosylation / Glycation 等後修飾均需要實際實驗數據支持。與此同時，關于免疫原性的預測近年來也逐漸興起，對于T細胞表位相關的免疫原性預測在一定程度上幫助我們降低了風險，但對于免疫原性的判斷僅僅依靠基于序列的分(fēn)析預測，恐怕還不足夠。

關于成藥性分(fēn)析的體(tǐ)外檢測項方法及阈值界定

關于成藥性分(fēn)析的體(tǐ)外檢測項方法及阈值界定，  AdiMab公司發布過較詳細的研究。他(tā)們将137個至少已經到達臨床二期的抗體(tǐ)分(fēn)子在HEK293細胞中進行瞬時表達，檢測12個不同的表征參數（ HEK titer ，TM ，PSR ，ACSINS ，CSI ，CIC ，HIC ，SMAC ，SGAC-SINS ，BVP ，Elisa ，AS ），利用(yòng)斯皮爾曼等級相關系數進行分(fēn)類，并将已被批準的抗體(tǐ)藥物(wù)的相關檢測數值的下線(xiàn)10%設定為(wèi)阈值。在所有檢測分(fēn)子中，已獲批的分(fēn)子中隻有少數分(fēn)子的個别檢項結果有異常，約65%的分(fēn)子所有表征均無問題；然而，在臨床二期的分(fēn)子中，無問題比例降低到40%，接近32%的分(fēn)子呈現出至少兩項的檢測異常。通過數據分(fēn)析，這兩個階段的分(fēn)子差異主要集中在 PSR / CSI / ACSINS / CIC / Elisa / BVP 檢項組，提示這些分(fēn)子可(kě)能(néng)由于其特異性問題導緻在體(tǐ)内被加速清除，進而影響藥效。這也從另一個角度證明，長(cháng)遠(yuǎn)來看，成藥性出現問題的分(fēn)子确實在上市的過程中存在或多(duō)或少的阻力。

成藥性的檢測流程

另外，還有一些公司的成藥性分(fēn)析是按照其重要程度和所需蛋白的用(yòng)量分(fēn)成了前期成藥性分(fēn)析---分(fēn)析集中在 CDR 區(qū)域，體(tǐ)現分(fēn)子 intrinsic property ，以及後期成藥性分(fēn)析---蛋白用(yòng)量較多(duō)，涉及整個分(fēn)子性質(zhì)，偏向 holistic property 。

這種成藥性的檢測流程條理(lǐ)清晰，其實更加貼近藥企的實際項目進展：在前期利用(yòng)序列分(fēn)析和少量檢測篩選掉部分(fēn)候選分(fēn)子，後期集中資源對最終分(fēn)子進行較全面的評價。在這個流程中，各個階段需要進行的成藥性檢項筆(bǐ)者歸納如下表：

在衆多(duō)方法中，多(duō)有重複表征，可(kě)根據自身資源靈活選擇。

行業進展到今天，在早期分(fēn)子篩選階段即同步開始早期成藥性分(fēn)析的理(lǐ)念已得到廣泛認同，但如上文(wén)提及，需要做哪些檢項，用(yòng)何種方法以及阈值如何劃定，各家選擇略有不同，可(kě)謂見仁見智。平心而論，成藥性評價既不能(néng)代替制劑的工作(zuò)，也沒有優化分(fēn)子的責任，其存在的意義，是在尚有選擇的時候，以小(xiǎo)的代價預防大的風險。如今的大分(fēn)子藥舞台，産品種類繁多(duō)。融彙奇思妙想的同時，也對分(fēn)子評價體(tǐ)系不斷提出新(xīn)的問題：nanobody 的成藥性如何評價，各種雙抗的成藥性如何評價，ADC又怎麽設立分(fēn)析檢項和阈值？這些問題亟待原有經驗結合新(xīn)項目數據的積累來解決，同時也要求成藥性分(fēn)析人員具備多(duō)學(xué)科(kē)的知識背景，和不遺漏，不渲染的客觀态度。

新(xīn)藥開發，道阻且長(cháng)，一路平衡，不斷取舍，說起來成藥性評價像是罅隙微光，提醒着“此處危崖，請繞行”。

引用(yòng)文(wén)獻

1.Developability Assessment During the Selection of Novel, Jarasch et al., JOURNAL OF PHARMACEUTICAL SCIENCES 104:1885–1898, 2015

2.Adimab-Biophysical properties of the clinical-stage antibody landscape. 944–949 | PNAS | January 31, 2017 | vol. 114 | no. 5

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5.Considerations for the design of Antibody-based Therapeutics. D.R. Goulet, W.M. Atkins / Journal of Pharmaceutical Sciences xxx (2019) 1-302

6.An alternative assay to hydrophobic interaction chromatography for high-throughput characterization of monoclonal antibodies. mAbs 7:3, 553--561; May/June 2015; Published with license by Taylor & Francis Group, LLC

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